技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLESmRNA上3個(gè)相鄰的堿基決定1個(gè)氨基酸。每3個(gè)這樣的堿基叫做1個(gè)密碼子。密碼子優(yōu)化是通過基因工程技術(shù),根據(jù)宿主的密碼子偏好性調(diào)整基因的同義密碼子,達(dá)到消除稀有密碼子的目的,并且優(yōu)化如mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)和Motif等相關(guān)參數(shù),從而提高翻譯效率。當(dāng)異源基因在宿主中無法有效表達(dá)時(shí),可以考慮進(jìn)行密碼子優(yōu)化,調(diào)整同義密碼子和相關(guān)的調(diào)控元件,提高翻譯效率。通過這種方法提高異源基因翻譯效率的報(bào)道已經(jīng)很多。如為了在人胚胎腎細(xì)胞(HEK293T)中提高重組豬白細(xì)胞介素-7(pIL-7)的表達(dá),崔...
1993年,比利時(shí)布魯塞爾自由大學(xué)免疫學(xué)家Hamers-Casterman教授以及他的同事們?cè)隈橊劊橊効?,后來研究證實(shí)也包括單峰駱駝和羊駝)的血清中發(fā)現(xiàn)了一種與傳統(tǒng)抗體結(jié)構(gòu)不同的新型抗體,這種抗體僅僅由兩條重鏈構(gòu)成,被稱為重鏈抗體(heavy-chainantibody,HCAb)。重鏈抗體的重鏈的可變區(qū)稱為VHH(variabledomainofheavychainofheavy-chainantibody),通過體外重組表達(dá)制備的VHH分子質(zhì)量僅僅為15kDa,是傳統(tǒng)抗...
當(dāng)建立內(nèi)切酶酶切反應(yīng)體系時(shí)有幾個(gè)關(guān)鍵因素需要考慮。比如如何在正確的反應(yīng)體系中,加入適量的DNA、內(nèi)切酶和緩沖液,就可以獲得最佳酶切效果。根據(jù)定義,在50μl體系中,1單位的限制性內(nèi)切酶可以在60分鐘內(nèi)*切割1μg的底物DNA。上述酶、DNA與總反應(yīng)體積的比值可以做為建立反應(yīng)體系的參考數(shù)據(jù)。但是,目前大多數(shù)科研人員會(huì)遵循下表中所列的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件,使用5-10倍的過量酶切割DNA,這樣有利于克服由于DNA來源不同、質(zhì)量和純度不同而造成的實(shí)驗(yàn)失敗。“標(biāo)準(zhǔn)”反應(yīng)體系內(nèi)切酶從冰箱取出后...
FrontierScientific,Inc.(簡稱FSI),創(chuàng)立于1975年,總部位于美國猶他州。自創(chuàng)立之初,F(xiàn)SI即開始為藥物研發(fā)、生物技術(shù)、工業(yè)化學(xué)、政府和科研機(jī)構(gòu)提供研發(fā)和生產(chǎn)所需要的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。FSI尤其擅長研發(fā)和制造卟啉、酞菁、高級(jí)硼酸(酯)、藥物研發(fā)用小分子中間體和SAR的研究,以及從毫克到公斤級(jí)別的先導(dǎo)優(yōu)化,并能夠?yàn)榭蛻籼峁〤RO、FTE或者FFS服務(wù)。FrontierScientific,Inc.(FSI)wasfoundedin1975byDr.Bru...
服務(wù)簡介無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)是一種以外源DNA或mRNA為模板,利用細(xì)胞抽提物中的細(xì)胞合成機(jī)器,蛋白折疊因子及其他相關(guān)酶系,通過添加氨基酸和T7聚合酶和能量物質(zhì)來實(shí)現(xiàn)蛋白表達(dá)的體外系統(tǒng)。其中包括真核無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和原核無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。艾柏森生物優(yōu)勢(shì)1.更快得到數(shù)據(jù),僅需1小時(shí)即可獲得功能蛋白,而基于細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)則需要數(shù)天。2.節(jié)約時(shí)間,表達(dá)蛋白可以直接用后續(xù)實(shí)驗(yàn),不需要額外純化。3.更適合蛋白表達(dá),更適用于激酶等毒性蛋白的表達(dá),也可使用經(jīng)過修飾的tRNA來進(jìn)行標(biāo)記,在某特定位點(diǎn)摻...
跑電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn),可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn),可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳的材料是瓊脂糖,瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)常用以DNA切膠回收,DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的一些小技巧小細(xì)節(jié)。1凝膠制作1.1凝膠濃度配制凝膠的濃度據(jù)實(shí)驗(yàn)需要而變,一般在0.8%~2.0%之間,如果一次配制凝膠100m...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染對(duì)初接觸細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的科研人員而言,是一道難過的坎兒,細(xì)胞轉(zhuǎn)染率低的話,你珍貴的細(xì)胞可能就只能扔掉了。一、轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類:1.物理介導(dǎo):電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例。2.化學(xué)介導(dǎo):方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)。3.生物介導(dǎo):方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法,應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介...
枯草芽孢桿菌,是芽孢桿菌屬的一種,廣泛分布在土壤及fubai的有機(jī)物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名枯草芽孢肝菌。枯草芽孢桿菌的主要優(yōu)勢(shì)在于,它是一種嗜溫、好氧、產(chǎn)芽孢的桿狀細(xì)菌,常采用人工誘變深層液體發(fā)酵濃縮精制而成。該菌在自然界中廣泛存在,對(duì)人畜無毒無害,不污染環(huán)境,能產(chǎn)生多種抗菌素和酶,具有廣譜抗菌活性和*的抗逆能力。它在農(nóng)作物上使用效果非常顯著、穩(wěn)定性強(qiáng)??莶菅挎邨U菌對(duì)果樹、棉花、小麥、辣椒、番茄、玉米、水稻、大豆、辣椒等農(nóng)作物上顯示出很好的防病和增產(chǎn)增收效果。目前市場(chǎng)上...
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